自制NSE单抗的鉴定及其双抗夹心ELISA方法的建立

• 作者: 丁焕弟 于占娇 李晓彤 杨赟 林志妙 龚慧婷
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 神经元特异性烯醇化酶(NSE) 单克隆抗体 鉴定 双抗体夹心 ELISA
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 922-925,935
• 分类号: R392.11
• 字数: 4117字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2012.10.013

摘要

目的:制备并鉴定NSE(Neuron-specific enolase)单克隆抗体,建立可检测NSE蛋白的双抗夹心ELISA方法.方法:用本实验室已表达纯化的NSE融合蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体.采用WB、IP、IF、IHC等方法对获得的NSE单抗进行鉴定及亚型检测.利用辣根过氧化物酶标记纯化后的NSE单抗,建立一个可检测NSE蛋白的双抗夹心ELISA法.结果:通过分析和鉴定,选定2株可稳定分泌抗NSE抗体的杂交瘤细胞株,效价达4.2×107~6.5×107,亚型为IgG2b.免疫印迹结果显示,该抗体不仅能识别细胞内源NSE蛋白,还能识别分泌到细胞培养上清液中的NSE蛋白,此外还可用于免疫荧光及免疫组化检测.文中所建立的双抗夹心ELISA法,最低检测极限为8.85 ng/ml.结论:成功获得了效价高、灵敏度好及特异性强的NSE单抗,建立了一个双抗体夹心ELISA检测系统,具有良好的临床应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晓彤	厦门大学生命科学学院杂交瘤抗体中心	6	5	2.0	2.0
2	丁焕弟	厦门大学生命科学学院杂交瘤抗体中心	2	3	1.0	1.0
3	林志妙	厦门大学生命科学学院杂交瘤抗体中心	2	2	1.0	1.0
4	杨赟	厦门大学生命科学学院杂交瘤抗体中心	2	4	2.0	2.0
5	龚慧婷	厦门大学生命科学学院杂交瘤抗体中心	2	4	2.0	2.0
6	于占娇	厦门大学生命科学学院杂交瘤抗体中心	2	4	2.0	2.0