铁皮石斛磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆及表达分析

• 作者: 徐绍忠 文国松 曾淑华 杨生超 查应红 段承俐
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 铁皮石斛 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 基因克隆 同源性分析 RT-PCR
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 766-771
• 分类号: R282.12
• 语种: 中文

摘要

目的 克隆铁皮石斛Dendrobium officinale磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(pepc)基因,并对其在F型和H型铁皮石斛中的表达进行分析,为研究铁皮石斛pepc基因的结构、功能提供依据.方法 基于GenBank上已知的pepc基因的同源序列设计引物,应用RT-PCR和RACE等方法,克隆铁皮石斛pepc基因全长.采用荧光定量PCR方法研究pepc基因在2种铁皮石斛中的表达.结果 成功克隆了铁皮石斛pepc基因,登录号为JF423930,该基因全长为3 560 bp,其中cds序列为2 895 bp,与兰科植物的同源性为80％左右,与其他科属植物的同源性达到70％以上,编码964个氨基酸.pepc基因在F型铁皮石斛中的表达量为H型的5.55倍.结论 成功克隆了铁皮石斛pepc基因,且F型铁皮石斛pepc基因的表达量高于H型.