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瘤胃微生物Fosmid文库蛋白酶活性克隆的筛选与序列分析
瘤胃微生物Fosmid文库蛋白酶活性克隆的筛选与序列分析
作者:
卜登攀
周凌云
孙鹏
王加启
赵圣国
赵静雯
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
瘤胃微生物
元基因组学
Fosmid文库
蛋白酶
末端序列
摘要:
在日粮蛋白质的降解过程中,蛋白酶是把蛋白质水解为肽或氨基酸的关键酶,由于受到纯培养技术的影响,瘤胃内产生蛋白酶活性的细菌和各种蛋白酶的遗传信息知之甚少.本实验旨在利用蛋白酶选择性培养基从瘤胃微生物Fosmid文库中筛选出含蛋白酶活性的克隆子,通过生物信息学分析获得这些克隆子的遗传信息.应用脱脂乳粉和大豆蛋白粉两种蛋白酶选择性培养基,从30 000个克隆中筛选得到14个具有蛋白酶活性的活性克隆.利用福林酚试剂法检测14个蛋白酶克隆子的酶活力,结果表明,每个克隆子分别具有不同的蛋白质分解能力.以酪蛋白为底物的克隆子酶活力介于0.59~2.74 U/mg之间,以大豆蛋白粉为底物的克隆子酶活力在0.70~7.19 U/mg之间,而且同一克隆对于不同的底物所表现的酶活力也不同.随机挑选10个活性克隆进行末端测序(GenBank登录号:JY084410~JY084429),经Blast比对后发现,45%的基因序列与已知编码基因无法匹配,pro 10F末端序列与金属肽酶匹配度为54%,属于肽酶M13家族,且该克隆蛋白酶最适pH值为7.0,为下一步研究该克隆的酶学性质和序列特征分析提供了基础资料.
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沤麻废水处理
原核微生物多样性
16S rRNA文库
碱性酶
内容分析
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篇名
瘤胃微生物Fosmid文库蛋白酶活性克隆的筛选与序列分析
来源期刊
农业生物技术学报
学科
关键词
瘤胃微生物
元基因组学
Fosmid文库
蛋白酶
末端序列
年,卷(期)
2012,(7)
所属期刊栏目
研究报告
研究方向
页码范围
831-836
页数
6页
分类号
字数
4519字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1674-7968.2012.07.014
五维指标
传播情况
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引文网络
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研究去脉
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相关学者/机构
期刊影响力
农业生物技术学报
主办单位:
中国农业大学
中国农业生物技术学会
出版周期:
月刊
ISSN:
1674-7968
CN:
11-3342/S
开本:
大16开
出版地:
北京海淀区圆明园西路2号中国农业大学生命科学楼1053室
邮发代号:
2-367
创刊时间:
1993
语种:
chi
出版文献量(篇)
4211
总下载数(次)
8
总被引数(次)
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