牛源大肠杆菌O157：H7的分离及毒力基因鉴定

• 作者: 何孔旺 叶青 张雪寒 栾晓婷 费荣梅 赵攀登
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛 肠出血性大肠杆菌O157：H7 毒力基因 致病性
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 人兽共患病
• 页码范围: 1148-1153
• 分类号: S852.61|R535
• 语种: 中文

摘要

从2个牛场采集新鲜粪便,增菌后,免疫磁珠富集,涂布筛选性培养基,挑取可疑菌落用rfbE/fliC二重PCR和血清学方法鉴定。设计毒力基因stx1、stx2、eae、hlyA和tccp相应引物,针对O157：H7对分离株进行PCR鉴定。口服攻毒链霉素处理的BALB/c小鼠明确分离株致病性。结果显示,成功分离到7株出血性大肠杆菌O157：H7,并且有1株迟缓性发酵山梨醇麦康凯培养基。毒力基因检测显示,其中6株毒力因子表型为stx1-stx2＋eae＋hlyA＋tccp＋,另有1株表现型为stx1＋stx2＋eae＋hlyA＋tccp＋,各分离株tccp基因均为阳性,但携带的重复片段数量有差异。所采集样品中肠出血性大肠杆菌O157：H7的检出率高达12%。1×1010 CFU同剂量口服接种经PBS洗涤的5株O157：H7分离株全菌,小鼠存活率有差异分别为40%,50%,60%,20%,50%,各分离株在小鼠体内排菌时间也有差异分别为攻毒后7,9,13,13,15d。