猪Gli1基因的克隆、表达谱分析及脂肪组织特异性表达载体的构建

• 作者: 张瑾 林佳丽 沈良才 潘登科
• 来源期刊: 遗传
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪 脂肪沉积 Gli1 基因克隆
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1291-1297
• 分类号: Q987
• 字数: 4646字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1005.2012.01291

摘要

Hedgehog(Hh) 信号通路对动物脂肪沉积具有抑制作用,并且从果蝇到脊椎动物具有高度保守性,但在家猪研究中鲜见报道.文章选择家猪Hh 通路的转录激活因子Gli1 进行研究,通过RT-PCR 结合RACE 技术,首次获得家猪Gli1 基因cDNA 全长,利用Real-time PCR 对家猪Gli1 基因在不同组织中的表达丰度进行了分析,并构建了真核表达载体和脂肪组织特异性表达载体.结果表明:猪Gli1 基因cDNA 全长3 576 bp,基因组序列全长10 715 bp,共12 个外显子,编码1 106 个氨基酸.生物信息学分析表明,猪Gli1 为不稳定亲水性蛋白,不具有跨膜结构域和信号肽序列,但具有锌指结构与核定位序列.对7 个物种的Gli1 蛋白序列和基因组序列相似性进行分析,发现各物种间序列相似性均在80%以上,说明Gli1 在物种间高度保守.组织表达谱分析表明,Gli1 仅在成体猪舌组织中表达; 在家猪脂肪组织发育进程中,Gli1 仅在出生1 周的猪脂肪组织中检测到微弱表达,但1 月龄及3 月龄猪脂肪组织中均检测不到表达,由此推断猪Gli1 表达与脂肪组织发育呈负相关.最后,将猪Gli1 编码区克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP,体外转染实验证明该载体能够正确表达猪Gli1,另外还构建了脂肪组织特异性表达载体,为构建脂肪组织特异性转基因动物奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘登科	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与种质创新重点实验室	32	131	8.0	10.0
2	张瑾	河北科技师范学院生命科技学院	10	48	3.0	6.0
3	林佳丽	河北科技师范学院生命科技学院	1	8	1.0	1.0
4	沈良才	河北科技师范学院生命科技学院	1	8	1.0	1.0