猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) GP3-GP5-M融合蛋白在哺乳动物细胞中的表达

• 作者: 刘学荣 刘建斌 吕志慧 牟克斌 王凡
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) GP3-GP5-M 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1201-1206
• 页数: 6页
• 字数: 3609字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2012.10.013

摘要

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是一种严重危害养猪业发展的传染病,为了PRRSV GP3-GP5(N-糖基化蛋白)-M(膜蛋白)融合蛋白在哺乳动物细胞中的表达及其免疫原性,本研究利用脂质体法将构建好的真核重组表达质粒pcDNA3.1-ORF3-ORF5-ORF6转染猪肾细胞(PK-15细胞),经G418(600 μg/mL)筛选(72 h)获得稳定表达PRRSV GP3-GP5-M融合蛋白的稳定细胞株.以RT-PCR分析目的基因转录；间接免疫荧光检测融合蛋白表达；Western blot和小鼠(Mus musculus)免疫试验检测融合蛋白免疫原性.结果表明,RT-PCR检测到3种目的基因的转录；间接免疫荧光检测到融合蛋白得以表达,Western blot检测到融合蛋白可与阳性猪血清发生特异性反应.小鼠免疫试验二免后S/P=样本/阳性对照的比率,达到1.80(S/P＞0.4为阳性),并且至少可以持续1个月.本研究成功实现了PRRSV GP3-GP5-M 融合蛋白在哺乳动物细胞中的表达,证实PRRSV GP3-GP5-M融合蛋白具有良好的免疫原性,为PRRSV 多基因核酸疫苗研制提供了基础资料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王凡		11	58	5.0	7.0
2	吕志慧		5	27	3.0	5.0
3	刘学荣		31	138	6.0	10.0
4	牟克斌		17	102	4.0	10.0
5	刘建斌	中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所	60	417	10.0	19.0