IFITM3基因的克隆及其在真核细胞中的表达与定位研究

• 作者: 任静强 孙丹丹 朱娜 李昌 李沂 杜寿文 王茂鹏 田宇飞 秦艳青 郭焱 金宁一
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: IFITM3 克隆 表达 定位
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 963-967
• 页数: 5页
• 分类号: Q781
• 字数: 4138字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2012.11.001

摘要

目的:干扰素rhIFN-α 2B体外诱导人胚胎肾细胞系293T细胞获得IFITM3基因,观察IFITM3基因在293T细胞中的表达与定位.方法:利用干扰素rhIFN-α 2B体外诱导293T细胞获得IFITM3基因,采用RT-PCR技术扩增获得干扰素诱导的跨膜蛋白IFITM3全长cDNA,扩增产物连接至pMD18-T载体上,测序正确后,将IFITM3基因亚克隆至真核表达载体pVAX1中获得重组质粒pV-IFITM3,通过转染293T细胞进行表达与定位研究.结果:RT-PCR和Western blot结果表明,获得的目的基因IFITM3能够表达,且具有良好抗原活性;激光共聚焦显微镜观察显示,IFITM3基因表达后主要分布于细胞膜上.结论:成功获得IFITM3基因,并验证了其表达.该研究为基于IFITM3的抗病毒药物以及探讨其抗病毒机制研究奠定了坚实基础.