Sterptomyces rochei4089的L基因阻断变株的构建及功能研究

• 作者: 张金池 王以光 王广林 王群
• 来源期刊: 生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 同源重组 Red/ET重组 AHBA-KLM基因簇 安莎
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-4
• 分类号: Q78
• 字数: 2714字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2012.01.001

摘要

运用同源重组技术破坏了一株格尔德霉素产生菌Sterptomyces rochei 4089的L基因,该基因编码氧化还原酶.以Sterptomyces rochei 4089基因组总DNA为模板,PCR扩增AHBA-KLM基因簇,采取Red/ET重组技术,构建L基因阻断质粒pKC1139-KLM-KmR.采用大肠杆菌与链霉菌的结合转移将阻断质粒含AHBA-KLM基因簇和Kan表达单元的3.0 kb线性片段转化Sterptomyces rochei 4089菌株,在卡纳霉素的平板上筛选卡纳霉素抗性转化子,经PCR检测分离到L基因阻断突变菌株.对原、变株的发酵液进行TLC和HPLC分析显示,Sterptomyces rochei 4089基因组中的L基因失活后,导致该菌株不能合成安莎类抗生素格尔德霉素.通过阻断L基因,为筛查这类放线菌产生安莎类抗生素提供了明确的组分指示作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张金池	南京林业大学森林资源与环境学院	292	4588	33.0	50.0
2	王广林	南京林业大学森林资源与环境学院	9	67	3.0	8.0
4	王以光	中国医学科学院医药生物技术研究所	32	355	11.0	18.0
7	王群	南京林业大学森林资源与环境学院	10	48	3.0	6.0