小麦Wcor719基因的原核表达及转化烟草和棉花提高抗冷性研究

• 作者: 张帅 李建平 李晓荣 李静 王冬梅 陈国华 黄乐平
• 来源期刊: 核农学报
• 学科: 农学
• 关键词: Wcor719基因 蛋白表达 转基因烟草 转基因棉花 抗寒性
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 420-426
• 分类号: S562
• 语种: 中文

摘要

为研究Wcor719基因的抗寒功能,获得具有抗寒性的棉花新种质,构建小麦冷诱导基因原核表达载体Wcor719-pET28a进行蛋白表达,SDS-PAGE分析表明其诱导蛋白大小约为24.0kD,表达量在诱导4h时达到最大,且与IPTG诱导浓度无明显相关性。同时通过农杆菌介导的叶盘法将构建的Wcor719-pCambia1301植物表达载体转入烟草（Nicotiana tabacum）SR-1中,T1代转基因烟草植株经过抗生素筛选和PCR检测后进行低温胁迫,测定抗寒生理指标,结果显示转基因植株的脯氨酸和可溶性糖含量均比对照有所提高。该基因经过功能验证后用花粉管通道法转入棉花（Gossypium hirsutum）新陆中49,T0代、T1代经过田间检测及PCR检测后研究T2代转基因棉花低温胁迫下的抗寒性,结果显示,转基因棉花脯氨酸含量和可溶性糖含量均在第5天达到峰值,且明显高于对照;而丙二醛含量低于对照,初步证明转基因烟草和棉花的抗寒性均有所提高,由此表明通过转冷调节基因来提高植物的抗寒性具有良好的应用前景。