猪脂联素球状结构域gAd基因在乳酸乳球菌中的表达

• 作者: 刘霭莎 吴同山 李加琪 李岩 江冠尧 胡文锋 陈真伟 黎立
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 脂联素 球状结构域 乳酸乳球菌
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 353-357
• 分类号: S828|Q344.13
• 字数: 2865字
• 语种: 中文

摘要

本研究旨在克隆猪脂联素球状结构域gAd基因,构建重组质粒并将其转化至乳酸乳球菌NZ9000中进行表达,并在体外对重组猪脂联素球状结构域进行生物学活性分析.提取猪脂肪组织总RNA,扩增得到脂联素基因全长并测序,设计引物引入酶切位点和His-tag,把gAd亚克隆到表达载体pNZ8048,将重组质粒转化乳酸乳球菌NZ9000中诱导表达.通过Ni2+亲和层析柱对重组蛋白纯化后再Western blotting检测.然后,将gAd蛋白注射到高糖饲喂的小鼠体内鉴定生物学活性.结果表明成功获得了gAd基因并在乳酸乳球菌NZ000中表达,表达产物相对分子质量约17 ku.经纯化后用Western blotting检验具有反应原性,动物试验证明制备的gAd蛋白能显著降低小鼠的血糖水平.本研究为利用外源重组脂联素球状结构域调节猪的脂肪代谢打下了良好的基础.