小鼠抗HCMV-gB多克隆抗体的制备及初步应用

• 作者: 于三科 韩慧平
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: CpG-ODN Al (OH)3 免疫佐剂 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 51-54
• 分类号: S852.659.5|S858.21
• 字数: 2840字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2012.02.012

摘要

为了快速制备抗HCMV-gB小鼠多克隆抗体,通过PCR扩增HCMV-gB (57 aa～146 aa)编码序列并克隆到原核表达载体pET21b(+)多克隆位点,用重组质粒转化大肠埃希菌Rosetta (DE3)并通过IPTG诱导表达,经镍胶亲和层析纯化和透析复性获得重组蛋白.以CpG-ODN和Al(OH)3复合佐剂作为重组蛋白的免疫佐剂,通过0周和3周2次肌肉注射免疫Balb/c小鼠,并在第5周采血分离免疫血清.用ELISA检测免疫血清效价,并通过Western blot检测免疫血清对哺乳动物细胞表达的HCMV-gB1和gB2的反应性.结果显示,本研究制备的免疫血清ELISA滴度达到1∶51 200～1∶102 400,进行Western blot 能够与哺乳动物细胞表达的HCMV-gB1和gB2发生特异性反应.此试验获得了能够用于后续研究工作的抗HCMV-gB小鼠多克隆抗体,本方法具有制备速度快、抗体滴度高和抗原用量少等优点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于三科	西北农林科技大学动物医学院	78	474	10.0	18.0
2	韩慧平	西北农林科技大学动物医学院	1	2	1.0	1.0