一种IFN-γ ELISPOT检测方法的建立

• 作者: 刘培培 吕品 王少雄 王洪芳
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 融合蛋白疫苗 细胞免疫 ELISPOT IFN-γ
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 62-66
• 分类号: R392
• 字数: 4560字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2012.01.014

摘要

目的:建立检测一种融合蛋白疫苗诱导特异性细胞免疫的ELISPOT实验方法,通过分析免疫小鼠分泌IFN-γ的水平,评价疫苗诱导的细胞免疫应答效应.方法:以融合蛋白疫苗免疫C57BL/6小鼠,14天后加强免疫一次,于第28天无菌取脾,分离脾淋巴细胞,计数并调整细胞浓度,在已包被好的ELISPOT板中分别加入细胞悬液和刺激肽进行刺激培养.裂解细胞,依次加入酶标二抗、底物、显色液,在ELISPOT读板仪进行斑点计数和分析.结果:ELISPOT检测结果与动物免疫途径、细胞培养时间、细胞密度、肽浓度等条件密切相关.实验结果证明:采用皮下注射的免疫途径,免疫效果最佳;小鼠脾淋巴细胞浓度为4×105个/孔,加入1 μg/孔的刺激肽刺激培养24～48小时的条件下,产生的特异性斑点数最多,本底干扰小,有利于结果判断.结论:实验建立了IFN-γ ELISPOT检测方法,可用于该融合蛋白疫苗细胞免疫研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘培培	上海泽润生物科技有限公司分析制剂室	1	6	1.0	1.0
2	王洪芳	上海泽润生物科技有限公司分析制剂室	2	6	1.0	2.0
3	吕品	上海泽润生物科技有限公司分析制剂室	1	6	1.0	1.0
4	王少雄	上海泽润生物科技有限公司分析制剂室	1	6	1.0	1.0