水中活的非可培养状态痢疾志贺菌荧光定量PCR检测方法研究

• 作者: 丁培 孙宗科 张伟 王友斌 郑萍 陈西平 鲁波
• 来源期刊: 环境与健康杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 痢疾志贺菌 活的非可培养状态 逆转录荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 基础与应用
• 页码范围: 590-592
• 分类号: R117
• 语种: 中文

摘要

目的 建立活的非可培养(viable but nonculturable state,VBNC)状态痢疾志贺菌逆转录荧光定量PCR (reverse transcription quantitative PCR,RT-qPCR)检测方法.方法 低温寡营养诱导痢疾志贺菌进入VBNC状态,用平板计数法和荧光显微镜检法确定细菌的可培养数和活菌数,以痢疾志贺菌的志贺毒素基因stx( GenBank:M19437)、侵袭性毒力基因ipaH( GenBank:NC_007607)为目的基因设计引物,提取RNA进行RT-qPCR检测,研究检出限并建立标准曲线,用加标于环境水体中的志贺菌水样进行方法验证.结果 建立处于VBNC状态的痢疾志贺菌RT-qPCR检测技术,检测时间少于6h,复杂环境水体中每500μl水样可培养的痢疾志贺菌检出限为1～5 cfu,VBNC状态的痢疾志贺菌3～25 cfu.结论 该方法检测快速,可实现对VBNC状态志贺菌的检测,可用于复杂水样的直接检测,适用于水体污染调查和应急反应时快速筛查志贺菌.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙宗科	中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所	44	171	7.0	11.0
2	张伟	中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所	90	386	10.0	16.0
3	鲁波	中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所	34	66	5.0	7.0
4	王友斌	中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所	39	251	7.0	15.0
5	郑萍	中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所	27	80	6.0	8.0
6	丁培	中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所	23	100	4.0	9.0