1型人类免疫缺陷病毒tat基因重组分泌型真核表达载体的构建

• 作者: 唐华英 曾怡 赵丽娟 陈源红 韦红玉
• 来源期刊: 微创医学
• 学科: 医学
• 关键词: 人类免疫缺陷病毒1型 tat基因 分泌型真核表达载体
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 347-350
• 分类号: R349.83
• 字数: 2627字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-6575.2012.04.004

摘要

目的 构建人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)tat基因分泌型真核表达载体.方法 聚合酶链反应(PCR)法从缺失pol基因的重组HIV-1基因组pNL4-3中扩增tat基因;将PCR获得的tat基因片段和pSecTag2B分泌型真核表达载体分别用Hind III酶切;pSecTag2B载体片段经小牛碱性磷酸酶去磷酸化后,用T4 DNA连接酶将tat基因与pSecTag2B载体片段连接过夜并转化感受态大肠杆菌DH5α,提取阳性克隆质粒进行Hind III酶切鉴定,并利用Nco I酶切鉴定克隆的tat基因反向.最后选取正向tat基因克隆质粒送基因测序.结果 PCR扩增产物在1%琼脂糖凝胶上约320bp位置出现条带,与预期的324bp大小一致;经Hind III和Nco I分别酶切鉴定,获得2个正向克隆;正向克隆经测序,克隆的tat基因序列与Genbank中登记的HIV-1 tat基因100%同源.结论 本研究方法可以成功地构建HIV-1 tat基因分泌型真核表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韦红玉	右江民族医学院微生物学与免疫学教研室	30	154	6.0	11.0
2	陈源红	右江民族医学院微生物学与免疫学教研室	32	137	7.0	10.0
3	赵丽娟	右江民族医学院微生物学与免疫学教研室	29	124	5.0	10.0
4	曾怡	右江民族医学院微生物学与免疫学教研室	37	170	7.0	12.0
5	唐华英	右江民族医学院微生物学与免疫学教研室	26	89	5.0	8.0