人胆固醇酯水解酶基因慢病毒载体构建及鉴定

• 作者: 关宁 冯旭 张兴海 王瑞 罗俊生 霍晓川 顾立学
• 来源期刊: 军医进修学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 胆固醇酯水解酶 慢病毒表达载体 病毒包装
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 页码范围: 1303-1305
• 分类号: R651.1
• 字数: 3136字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-1139.2012.12.038

摘要

目的构建含有人胆固醇酯水解酶(hCEH)基因的慢病毒表达载体pLenti6.3-hCEH-IRES-EGFP,为hCEH基因治疗缺血性脑卒奠定基础.方法应用聚合酶链反应方法扩增目的片段,在目的基因进行上、下游分别加上Pac I和Asc I两个酶切位点,经双酶切后,转化入感受态DH5α细胞中,通过筛选获得重组质粒.将目的基因片段和pLenti6.3-IRES-EGFP载体连接,获得慢病毒表达载体pLenti6.3-hCEH-IRES-EGFP,并进行测序.抽提慢病毒载体,转染293T细胞,包装病毒,测定病毒滴度.结果目的基因与慢病毒表达载体pLenti6.3-IRES-EGFP连接,慢病毒表达载体pLenti6.3-hCEH-IRES-EGFP构建与预期相匹配,包装细胞293T呈绿色荧光.结论成功构建了携带hCEH基因的慢病毒载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗俊生		60	200	7.0	9.0
2	冯旭		12	36	4.0	5.0
3	关宁		54	204	8.0	10.0
4	霍晓川		41	127	6.0	8.0
5	王瑞		10	48	4.0	6.0
6	顾立学		29	326	10.0	17.0
7	张兴海		2	5	2.0	2.0