利用多位点Gateway技术构建小鼠平滑肌肌动蛋白α基因启动子慢病毒载体

• 作者: 彭朝权 李伟强 胡晓俊 袁晓峰 项鹏
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 平滑肌肌动蛋白α 多位点Gateway技术 慢病毒 绿色荧光蛋白 干细胞
• 年，卷（期）: 2012,（27）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 5087-5091
• 页数: 5页
• 分类号: R394.2
• 字数: 5140字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2012.27.028

摘要

背景:平滑肌肌动蛋白α基因是相对局限于在血管平滑肌细胞中表达的少数几个基因之一,公认是血管平滑肌细胞表型转化的标志.目的:利用多位点Gateway技术构建慢病毒载体pLVpuro/平滑肌肌动蛋白α控制绿色荧光蛋白基因的表达.方法:设计合成含有attB位点的小鼠平滑肌肌动蛋白α基因启动子引物,构建pUp-平滑肌肌动蛋白α;通过LR反应将pUp-平滑肌肌动蛋白α和pDown-绿色荧光蛋白(含att位点的绿色荧光蛋白入门克隆)连接到目的载体pDEST-puromycin,得到pLVpuro/平滑肌肌动蛋白α-绿色荧光蛋白表达载体;经PCR和测序鉴定,将载体质粒瞬时转染C2C12细胞系,并且用免疫荧光染色检测基因的表达.结果与结论:成功构建pLVpuro/平滑肌肌动蛋白α-绿色荧光蛋白报告基因载体,测序结果表明启动子序列正确;细胞转染实验以及免疫荧光检测证实构建的报告基因载体可以反映平滑肌肌动蛋白α基因的表达情况.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭朝权	中山大学附属第三医院心内科	44	170	7.0	11.0
2	项鹏	中山大学干细胞与组织工程研究中心	45	297	10.0	15.0
3	李伟强	中山大学干细胞与组织工程研究中心	9	11	2.0	2.0
4	胡晓俊	中山大学附属第三医院放射科	9	10	2.0	2.0
5	袁晓峰	中山大学附属第三医院心内科	4	58	3.0	4.0