人BNIP3基因真核表达载体的构建及其对HT-29细胞化疗敏感性的影响

• 作者: 梁后杰 江恒 裴莉 边志衡 陈克力 陈建芳
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 结肠肿瘤 HT-29细胞 BNIP3基因 化疗 凋亡 表达载体
• 年，卷（期）: 2013,（15）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1548-1551
• 分类号: R394-33|R73-362|R735.35
• 语种: 中文

摘要

目的 构建人BNIP3真核表达载体,观察BNIP3高表达对人结肠癌细胞HT-29化疗敏感性的影响.方法 PCR法扩增BNIP3基因,酶切后插入质粒pEGFP-C3,构建重组真核表达载体pEGFP-C3/BNIP3.脂质体转染人结肠癌细胞HT-29,Western blot检测BNIP3蛋白表达.MTT法检测5-氟尿嘧啶(5-Fu)的化疗敏感性和细胞增殖,AnnexinV-APC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡.结果 酶切电泳分析和DNA序列测定证实,重组质粒pEGFP-C3/BNIP3构建成功；转染重组质粒的HT-29细胞BNIP3蛋白明显高表达.与未转染组和转染空质粒pEGFP-C3组比较,转染pEGFP-C3/BNIP3组5-Fu的IC50值显著降低[(120.11 ±5.45)、(113.40 ±4.72) μg/mL vs (19.08 ±2.62) μg/mL,P＜0.05],细胞凋亡率显著增加[(5.51±0.32)％、(7.19±0.47)％vs (41.72±1.48)％,P＜0.05],细胞克隆形成显著减少[(52±6)、(49±5)vs(11±3),P＜0.05],细胞增殖速度减慢.结论 成功构建了人BNIP3真核表达载体,BNIP3高表达可增加HT-29细胞对5-Fu的化疗敏感性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	边志衡	第三军医大学西南医院肿瘤科	62	337	10.0	14.0
2	梁后杰	第三军医大学西南医院肿瘤科	197	911	14.0	18.0
3	江恒	第三军医大学西南医院肿瘤科	18	50	4.0	6.0
4	陈克力	第三军医大学西南医院肿瘤科	19	66	5.0	7.0
5	裴莉	第三军医大学西南医院血液科	26	49	4.0	5.0
6	陈建芳	第三军医大学西南医院肿瘤科	13	61	5.0	7.0