Lp-PLA2的重组表达及单克隆抗体的制备

• 作者: 叶芸* 李苏亮 王建军 袁小华 齐欣
• 来源期刊: 中国血液流变学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脂蛋白相关磷脂酶 A2 单克隆 重组蛋白
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 页码范围: 20-23
• 分类号: R446.6
• 字数: 3011字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-881X.2013.01.006

摘要

目的构建人脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)的表达载体,表达Lp-PLA2重组蛋白,并制备其单克隆抗体(mAb).方法合成Lp-PLA2基因并插入融合表达载体pBV220的多克隆位点,构建重组表达质粒pBV220/Lp-PLA2.以重组质粒转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性重组子诱导目的蛋白的表达,表达产物的免疫学活性用Western blot进行鉴定.以基因重组的Lp-PLA2蛋白为抗原,常规方法免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与NS-1细胞融合,获得稳定分泌Lp-PLA2 mAb的杂交瘤细胞株,ELISA检测mAb的效价;Western blot检测mAb的特异性.结果酶切鉴定和DNA测序显示Lp-PLA2重组表达载体中含有人Lp-PLA2全长编码序列.将该重组载体转化入大肠杆菌DH5α中表达所得蛋白经Western blot验证为目的蛋白,筛选出2株能稳定分泌特异性抗Lp-PLA2的mAb杂交瘤细胞株.结论该研究成功地构建了Lp-PLA2表达载体、表达出Lp-PLA2重组蛋白,制备出抗Lp-PLA2 mAb,为进一步用于Lp-PLA2的体外免疫学检测奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李苏亮		30	152	7.0	11.0
2	王建军		14	44	4.0	5.0
3	袁小华		6	5	2.0	2.0
4	齐欣		3	8	2.0	2.0
5	叶芸*		1	2	1.0	1.0