SV40增强子对奶牛β-酪蛋白启动子活性的影响

• 作者: 江黎明 邵正 钟宇
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: SV40增强子 奶牛op0 双荧光素酶报告基因检测系统
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 175-179,187
• 页数: 6页
• 语种: 中文

摘要

该文采用重叠PCR方法在奶牛p-酪蛋白启动子(op0)中插入SV40增强子构建重组启动子op0-SV40enh,并分析其活性.首先PCR扩增op0 5'-端2.1 Kb片段、op0 3'-端1 Kb片段和SV40增强子序列,重叠PCR拼接三种片段得到插入SV40增强子的op0-SV40enh启动子并测序鉴定后,酶切连接将其插入pGL3-Basic中的指定克隆位点,构建重组载体pGL3-op0-SV40enh.将重组载体pGL3-op0和pGL3-op0-SV40enh分别瞬时转染乳腺癌MCF-7细胞,采用双荧光素酶报告基因检测系统检测启动子op0和op0-SV40enh的相对活性.结果显示,重叠PCR拼接出长度为3.4 Kb的片段,测序结果与预期结果一致,表明成功构建了重组载体pGL3-op0-SV40enh; op0-SV40enh启动子的活性远高于op0启动子的活性,表明奶牛β-酪蛋白启动子中插入SV40增强子序列可显著提高其引导荧光素酶报告基因表达的活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	江黎明		96	614	13.0	18.0
2	邵正		11	17	2.0	4.0
3	钟宇		5	43	4.0	5.0