双钩巢粉虱的种特异性SS-COⅠ检测技术

• 作者: 万方浩 张桂芬 张金良 曹凤勤 李小凤 杨婷 王瑞 郭建洋 郭建英
• 来源期刊: 生物安全学报
• 关键词: 双钩巢粉虱 种特异性SS-COⅠ引物 快速鉴定 分子检测
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 生物入侵
• 页码范围: 157-162
• 页数: 6页
• 字数: 4282字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1787.2013.03.002

摘要

[背景]双钩巢粉虱是近年在我国南方新发现的一种入侵害虫,其寄主范围广,危害严重,进一步扩散蔓延趋势明显.[方法]针对粉虱类害虫体型微小、形态相似、难以准确快速识别的问题,以双钩巢粉虱为靶标,以我国常见的其他8种/隐种粉虱为参照,采用基于mtDNA COⅠ基因的种特异性SS-COⅠ方法,研究其快速分子检测技术.利用COⅠ通用型引物LCO-1490/HCO-2198获得双钩巢粉虱及其他常见粉虱的COⅠ序列,根据测序结果设计特异性SS-COⅠ引物1对(PPZYF1/PPZYR1),其扩增片段大小为233 bp.[结果]种特异性检验结果显示,该引物只对双钩巢粉虱的COⅠ基因具有扩增能力,对其他种/隐种粉虱,包括烟粉虱的不同隐种(MEAM1隐种、MED隐种、AsiaⅡ3隐种和AsiaⅡ1隐种)以及温室粉虱、柑橘粉虱、黑刺粉虱、螺旋粉虱等不具有扩增效果.该引物不仅对不同性别的成虫具有良好的扩增能力,对1～4龄若虫和单粒卵亦具有同样的扩增效能,其最低检测阈值为1/40960头雌性成虫.[结论与意义]本检测技术对口岸检疫以及观赏植物、果树及其种苗调运中的害虫检测、监测意义重大.