抗VEGF单克隆抗体Fab片段在大肠杆菌的表达

• 作者: YE Ya-Dong 叶亚东 朱文华 滕凌 霍世元
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 抗VEGF Fab抗体 原核表达 共表达
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1085-1088,1092
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3819字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2013.10.019

摘要

目的:构建、表达、纯化抗血管内皮生长因子(VEGF)的Fab片段(眼明,Vasculizumab),并检测其抗VEGF的活性.方法:首先对轻链(LC)及重链(HC)基因进行密码子优化并做了全基因合成,将补充了OmpA信号肽核苷酸序列的轻链及重链基因分别克隆到表达质粒pET21a中,成功构建共表达质粒pET21 a-LC-HC,目的基因测序正确.然后转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21 (DE3)中诱导表达,并进行了温度和IPTG诱导浓度的条件优化.结果:确定大肠杆菌周质分泌表达摇瓶发酵最佳条件为:OD600达到0.6 ～0.8时加入0.1 mmol/L IPTG,18℃诱导18小时.SDS-PAGE检测目的蛋白Fab有表达.结论:表达纯化后的Fab有抗VEGF活性,可为新药筛选提供材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	霍世元		1	3	1.0	1.0
2	朱文华		1	3	1.0	1.0
3	滕凌		1	3	1.0	1.0
4	叶亚东		1	3	1.0	1.0