牛病毒性腹泻病毒双单克隆抗体夹心ELISA检测方法的建立及初步应用

• 作者: 卢体康 吕建强 唐金明 孙洁 张彩虹 曹琛福 曾少灵 杨俊兴 陶虹
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 牛病毒性腹泻病毒 酶联免疫吸附试验 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 11-16
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 4829字
• 语种: 中文

摘要

为了建立牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗原快速检测ELISA方法,用于BVDV抗原的快速检测.用纯化的BVDV作为抗原,经动物免疫、细胞融合、间接ELISA筛选和亚克隆,得到了3株抗BVDV的单克隆抗体(2A6、2F4和5C9).选用单克隆抗体2A6和5C9包被ELISA板,用HRP标记的单克隆抗体2F4作为夹心抗体,建立了检测BVDV的双单克隆抗体夹心ELISA方法.通过对BVDV阳性样品、其他病毒阳性样品和阴性对照样品及系列稀释的阳性样品检测,表明该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性.用ELISA检测326份临床样品,结果表明该方法与RT-PCR和商品化ELISA试剂盒检测结果符合率分别为98.8％和99.0％.该方法可以用于BVDV抗原快速检测和对大量样本的筛选.