西尼罗河病毒E蛋白结构域Ⅲ的原核表达及间接ELISA方法的建立

• 作者: 吕喆 夏咸柱 杜东菊 杨松涛 胡桂学 高玉伟
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 西尼罗河病毒 重组DⅢ蛋白 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1181-1185
• 页数: 5页
• 分类号: R373
• 字数: 4213字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2013.12.011

摘要

目的 建立西尼罗河病毒(West Nile Virus,WNV)抗体检测方法.方法 人工合成了WNV NY99株E蛋白结构域Ⅲ(DⅢ)基因序列,构建了重组表达载体PET-28a-DⅢ.结果 重组质粒转化BL21宿主菌后诱导表达,SDS-PAGE分析表明,表达产物相对分子量17 kD,以包涵体形式存在.对表达产物作变性和复性及纯化处理,Western-blot鉴定结果表明,纯化产物可被WNV血清识别.将纯化重组蛋白包被酶标板,优化间接ELISA反应条件,抗原最佳包被浓度为3.75 μg/mL、血清最佳稀释度为1∶1 600、酶标二抗最佳稀释度1∶6 000、阴阳血清临界值为0.148.特异性、敏感性及重复性试验结果表明,本方法特异性强、敏感性高、重复性良好.结论 本研究为WNV感染的血清学诊断提供了技术储备.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡桂学	吉林农业大学动物科学技术学院	185	837	15.0	21.0
2	夏咸柱	解放军军事医学科学院军事兽医研究所	59	634	15.0	23.0
3	杨松涛	解放军军事医学科学院军事兽医研究所	22	111	6.0	10.0
4	杜东菊	吉林农业大学动物科学技术学院	17	23	3.0	4.0
5	高玉伟	解放军军事医学科学院军事兽医研究所	21	197	6.0	14.0
6	吕喆	吉林农业大学动物科学技术学院	2	10	2.0	2.0