非洲马瘟病毒实时荧光定量 RT-PCR 检测方法的建立

• 作者: 李富祥 杨仕标 赵文华
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 非洲马瘟病毒 血清型 SYBR Green I 实时荧光定量 RT-PCR
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 11-16
• 页数: 6页
• 分类号: S852.651|Q786
• 字数: 4032字
• 语种: 中文

摘要

非洲马瘟病毒（AHSV）为双股 RNA 病毒，能感染所有马科动物。为建立一种 AHSV 快速检测方法，根据 GenBank 及作者所测 AHSV 9个血清型 VP7-ORF 全长核苷酸序列，设计一对位于 AHSV 基因组 S7片段的特异引物，然后进行荧光定量检测。经试验，证实该对引物对9种血清型的 AHSV RNA 均有特异性扩增，能检出特异荧光信号，而对与 AHSV 同属的蓝舌病病毒（BTV）、鹿流行性出血症病毒（EHDV）及正常马淋巴组织和阴性对照均无扩增，无有效荧光信号可检出。以国家外来动物疫病诊断实验室已构建好的 AHSV 9型 pMD18-T-VP7质粒为标准品可建立良好的标准曲线，实现对检测样本的实时定量。本研究建立了模板预变性结合“三步”法敏感特异的 AHSV 实时荧光定量 RT-PCR 快速检测方法，检测灵敏度可达102拷贝/μL。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨仕标	云南省畜牧兽医科学院国家外来动物疫病诊断实验室云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室	36	92	5.0	7.0
2	李富祥	云南省畜牧兽医科学院国家外来动物疫病诊断实验室云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室	39	106	7.0	7.0
3	赵文华	云南省畜牧兽医科学院国家外来动物疫病诊断实验室云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室	26	63	4.0	6.0