乙型脑炎疫苗株SA14-14-2包膜蛋白279位氨基酸回复突变对其毒力的影响

• 作者: 倪谦枝 刘丽娜 曾献武 李玉华 李竹石 杨会强 杨健 林华 汪伟
• 来源期刊: 川北医学院学报
• 关键词: 乙型脑炎病毒 疫苗 回复突变
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 325-330
• 页数: 6页
• 分类号: R373.3+1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-3697.2013.04.07

摘要

目的:探索乙型脑炎病毒(JEV)疫苗株SA14-14-2包膜蛋白279位氨基酸(E279)MK回复突变(M279K)对其毒力的影响.方法:用重叠延伸PCR技术和基因克隆技术构建含有SA14-14-2包膜蛋白M279K突变的全长cDNA质粒pACNR-JEV(M279K),并以其为模板体外转录RNA,将RNA电转染导入BHK21细胞得到恢复病毒rJEV(M279K),并比较恢复病毒和疫苗病毒在蚀斑大小以及对小鼠神经毒力等方面的差别.结果:酶切及测序表明质粒模板成功构建,除人为引入的突变外(碱基1813处T→A),无任何碱基突变,并发现rJEV(M279K)形成比疫苗株更小的蚀斑,但毒力与疫苗株无显著差异.结论:E279回复突变影响乙脑疫苗SA14-14-2病毒蚀斑大小,但并未明显增强疫苗株对小鼠的神经毒力.