流行性乙型脑炎病毒SA14-14-2株E蛋白基因在原核细胞中的高效表达及其表达产物的抗原性分析

• 作者: 何孔旺 杨耀武 沈国顺 陈德胜 陈溥言 齐香荣
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 流行性乙型脑炎病毒 E蛋白基因 反转录-聚合酶链反应 克隆 表达 抗原性
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 31-35
• 页数: 5页
• 分类号: R373.3
• 字数: 3686字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2003.05.008

摘要

目的获得JEV E蛋白基因并使其在E.coli中高效表达,以研究其抗原活性,为进一步研制ELISA早期诊断试剂盒奠定基础.方法根据已发表的JEV SA-14-14-2减毒株序列,设计一对特异性引物,通过RT-PCR扩增出E蛋白基因的cDNA片段,并将其克隆入pET-32a(+)表达载体中,构建重组融合表达载体pET-E,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,利用IPTG诱导获得高效表达.结果扩增的E蛋白基因片段长1113bp,编码371个氨基酸残基,该基因片段与国内发表的减毒株SA14-14-2碱基序列同源性为100%.表达产物分子量约为62kD,经Western blotting分析表明表达产物具有较好的抗原性.结论通过序列分析表明,我国的JEV SA-14-14-2减毒株未发生基因突变.表达产物的稳定高效表达及其抗原特异性分析为今后ELISA早期诊断试剂盒的研制提供了依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何孔旺	江苏省农业科学院畜牧善医研究所	101	1368	22.0	33.0
2	陈溥言	南京农业大学动物医学院传染病组农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室	269	2875	28.0	40.0
3	杨耀武	南京农业大学动物医学院传染病组农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室	2	45	2.0	2.0
5	陈德胜	南京农业大学动物医学院传染病组农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室	34	786	14.0	27.0
6	齐香荣	南京农业大学动物医学院传染病组农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室	2	9	1.0	2.0