用纯化的重组 GST-MSTN 蛋白免疫 Balb/c 小鼠,采用杂交瘤技术制备鼠抗猪肌生成抑制素单克隆抗体。以纯化的 MSTN C 端成熟蛋白为检测抗原,采用 ELISA 的方法检测免疫小鼠血清抗体效价、杂交瘤细胞培养上清效价、纯化腹水效价、免疫球蛋白的类型和亚类,抗体相加指数。用 Western blot 检测抗体的特异性。结果表明:3D3、1G8和10H13株单克隆抗体细胞培养上清效价分别为1∶400,1∶800,1∶800,纯化腹水效价分别为1∶16000,1∶32000,1∶32000。Western blot 分析显示,3株单抗均能与重组 MSTN 蛋白特异结合。免疫球蛋白亚类鉴定显示杂交瘤细胞所分泌的抗体中3D3属于 IgM亚类,1G8和10H1属于 IgG2a 亚类。抗体相加试验结果表明3D3、1G8与10H1有不同的抗原识别位点。