肠出血性大肠杆菌O157∶H7的快速可视化检测

• 作者: 吕恒 张锦海 王平 王玉邦 王长军 顾海涛
• 来源期刊: 东南国防医药
• 学科: 医学
• 关键词: 肠出血性大肠杆菌O157∶H7 可视化检测 环介导等温扩增 羟基萘酚蓝
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 321-324
• 页数: 4页
• 分类号: R378.2
• 字数: 3439字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-271X.2013.04.001

摘要

目的 应用环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术和羟基萘酚蓝(Hydroxynaphtholblue,HNB)指示剂建立肠出血性大肠杆菌(EHEC) O157∶H7快速可视化检测方法.方法 针对EHEC O157∶H7脂多糖编码基因rfbE保守区设计LAMP引物及环引物,反应体系加入染料HNB作为LAMP扩增的指示剂,结合LAMP浊度仪优化扩增条件,根据HNB的颜色变化进行结果判定,并评价检测方法的特异性和灵敏度.结果 本方法最低检出限约为100拷贝/反应管,高于普通PCR;检测特异性高,仅EHEC O157∶H7反应管HNB颜色由紫罗兰变成天蓝色,而肠产毒性大肠杆菌(ETEC)、肠致病性大肠杆菌(EPEC)、肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)、肠聚集性大肠杆菌(EAEC)、宋内志贺菌、福氏志贺菌均不发生变色反应；体系的扩增效率高于普通PCR,40 min内出结果.结论 建立的基于颜色判定的EHEC O157∶H7 LAMP检测方法具有特异、灵敏、设备要求简单等特点,适用于EHEC O157∶H7现场快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王玉邦	南京医科大学公共卫生学院	41	269	10.0	15.0
2	张锦海		42	165	8.0	9.0
3	王长军		134	625	12.0	17.0
4	顾海涛		20	70	5.0	7.0
5	王平		21	58	5.0	6.0