鼻咽癌相关新基因NPCEDRG突变型重组表达载体的构建及生物信息学分析

• 作者: 张小丽 胡华 贺修胜 贺荣芳 赵强 阳帅 龚邵新
• 来源期刊: 中南医学科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: NPCEDRG 聚合酶链式反应 随机突变
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 551-554,569
• 页数: 5页
• 分类号: R739.6
• 字数: 3273字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建带His标签的突变型及野生型pcDNATM3.1/myc-HisB/NPCEDRG重组表达载体.方法 以pcDNA3.1-NPCEDRG重组质粒为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增NPCEDRG基因编码区,利用PCR过程中的碱基错配,随机突变产生NPCEDRG的突变体,分别将野生型及突变型NPCEDRG基因编码区cDNA插入pcDNATM3.1/myc-HisB真核表达载体,双酶切鉴定,测序验证,生物信息学方法进行蛋白质结构预测.结果 双酶切突变型及野生型pcDNATM3.1/myc-HisB/NPCEDRG重组表达载体,均产生519 bp长度的目的 片断.测序结果证实,突变型NPCEDRG基因有两个点发生了突变,分别是T260-C260和T287-C287,但没有移码突变,在线生物信息学分析结果示其相应氨基酸序列改变为V73-A73和M82-T82;野生型NPCEDRG基因序列与Genebank已知序列一致.两个重组载体插入片段大小均为513 bp,插入方向及位置正确,能表达预期所要的融合蛋白.结论 成功构建了带His标签的突变型及野生型pcDNATM3.1/myc-HisB/NPCEDRG重组表达载体,为深入研究NPCEDRG基因功能和揭示鼻咽癌发病分子机制提供实验手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贺荣芳	南华大学附属第一医院病理科	20	93	5.0	9.0
2	贺修胜	南华大学肿瘤研究所	92	479	11.0	15.0
3	龚邵新	南华大学附属第一医院病理科	19	76	5.0	8.0
4	赵强	南华大学附属第一医院病理科	49	269	10.0	13.0
5	阳帅	南华大学附属第一医院病理科	16	67	4.0	7.0
6	胡华	南华大学附属第二医院病理科	11	29	4.0	4.0
7	张小丽	南华大学附属第一医院病理科	12	36	4.0	5.0