DHPLC方法检测并定量线粒体DNA 1555A>G异质性突变

• 作者: 刘畅 徐志勇 沈姗姗 王沙燕 王琳凯 胡玉华 高国凤
• 来源期刊: 中华耳科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 变性高效液相色谱 线粒体DNA 异质性突变 定量分析
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 469-473
• 页数: 5页
• 分类号: R349.6
• 字数: 3791字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-2922.2013.03.030

摘要

目的建立一种可靠、灵敏的DHPLC方法检测并定量线粒体DNA 1555A>G异质性突变。方法采用克隆技术构建已知突变负荷的标准品，以此为实验材料，对影响DHPLC仪器检测准确性的主要因素进行探索和优化，建立最佳的DHPLC检测条件。收集氨基糖甙类药物性耳聋患者10例，听力正常的家属成员40例，使用DHPLC方法检测并定量其异质性水平，并与传统的检测方法PCR-RFLP和直接测序法进行对比验证。结果获得已知突变负荷的标准品，建立了一套最优的DHPLC方法检测并定量1555A>G异质性突变。在10例患者中，DHPLC共检出6例异质性突变个体，而利用传统的检测方法只检出4例；此外，在经传统检测方法确认为野生型的40例对照中，采用DHPLC方法又检出2例低水平的异质性突变个体。结论DHPLC可以作为一种可靠、灵敏的筛选异质性突变的方法，能够快速准确的对线粒体DNA 1555A>G异质性突变进行检测并定量。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡玉华		16	55	4.0	6.0
2	王沙燕	暨南大学第二临床医学院	45	272	9.0	15.0
3	高国凤		7	16	3.0	3.0
4	刘畅		4	10	2.0	3.0
5	徐志勇		3	10	2.0	3.0
6	王琳凯		1	4	1.0	1.0
7	沈姗姗		4	14	2.0	3.0