创伤弧菌溶细胞素蓖麻毒素B活性模序的预测、克隆表达和功能鉴定

• 作者: 楼永良 王永明 谢旦立 金疆
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 创伤弧菌 溶细胞素 蓖麻毒素B链
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 细菌学
• 页码范围: 364-368
• 页数: 5页
• 字数: 3739字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2013.05.012

摘要

目的 研究克隆表达的创伤弧菌溶细胞素(vvC)中的重组蓖麻毒素B(rRicin B)功能模序,明确其功能,进一步阐明创伤弧菌溶细胞素的分子致病机制.方法 生物信息学预测VVC中的功能模序,构建pET28a-rRicin B原核表达系统,并通过IPTG诱导表达、三步洗涤、Ni2+-NTA柱亲和层析法纯化、复性、ELISA检测和激光共聚焦显微镜检测FITC标记的rRicin B与Hela细胞相互作用等.结果 通过生物信息学预测到VVC中336～465位氨基酸序列可能存在蓖麻毒素B链的功能模序,克隆表达这段模序后,其相对分子质量为20×103,经ELISA法检测复性后蓖麻毒素抗原性为28.71 U/L;Hela细胞经FITC标记的rRicin B作用后其细胞膜表面和胞质均有绿色荧光产生.结论 VVC中存在具有类似天然蓖麻毒素B链功能的模序,能与细胞膜表面结合并进入胞质,可能与创伤弧菌溶细胞素膜成孔和细胞毒活性有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王永明	浙江省诸暨市人民医院检验科	11	31	4.0	5.0
2	谢旦立	检验医学省部共建教育部重点实验室温州医学院检验医学院	5	7	1.0	2.0
3	楼永良	检验医学省部共建教育部重点实验室温州医学院检验医学院	9	17	2.0	3.0
4	金疆	检验医学省部共建教育部重点实验室温州医学院检验医学院	1	4	1.0	1.0