蚬壳花椒ISSR-PCR反应体系的建立及优化

• 作者: 孙吉康 孙小青 李猛 王平 程鹏
• 来源期刊: 广西植物
• 学科: 生物学
• 关键词: 蚬壳花椒 正交优化 ISSR-PCR
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 植物生理与分子生物学
• 页码范围: 185-190
• 页数: 6页
• 分类号: Q949
• 字数: 3316字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-3142.2013.02.009

摘要

通过单因素试验及正交设计方法对影响蚬壳花椒ISSR-PCR扩增的主要因素(模板DNA、Mg·2+的浓度、引物、dNTPs,TaqDNA聚合酶的用量以及退火温度)进行优化,以建立蚬壳花椒ISSR-PCR反应的最佳体系.结果表明:最佳反应体系(20 μL)为模板DNA 60 ng、MgCl2 2.5 mmol/L、dNTPs 0.15 mmol/L、引物0.6 μmol/L、Taq DNA聚合酶2.4 U.在此基础上,从100条引物中筛选出18条扩增稳定、多态性好的ISSR引物并经过10份蚬壳花椒种质检验,证明该体系具有扩增条带清晰、稳定、重复性好等优点.该反应体系的建立为蚬壳花椒种质资源分类、遗传多样性分析提供了更客观可靠的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王平	中南林业科技大学生命科学与技术学院	112	1414	21.0	31.0
2	李猛	中南林业科技大学生命科学与技术学院	6	34	4.0	5.0
3	孙吉康	中南林业科技大学生命科学与技术学院	24	151	6.0	11.0
4	孙小青	中南林业科技大学生命科学与技术学院	3	19	2.0	3.0
5	程鹏	中南林业科技大学生命科学与技术学院	5	63	3.0	5.0