筛选HIV-1 P24蛋白适配子的一种简便的SELEX方法

• 作者: 张晓光 曾毅 李红霞 詹少兵
• 来源期刊: 中华实验和临床病毒学杂志
• 关键词: HIV 配体系统进化技术 适配子
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 218-220
• 页数: 3页
• 字数: 2401字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2013.03.020

摘要

目的 快速筛选HIV-1 P24抗原适配子,并验证其特异性与亲和力.方法 利用聚碳酯材料PCR板包被P24抗原,在PCR板中运用SELEX技术进行适配子筛选.对多条适配子序列进行了一级结构及二级结构软件分析.酶联免疫法(ELISA)对筛选到的适配子进行亲和力及特异性验证.结果 确定用聚碳酯材料可以包被P24抗原,ELISA法检测抗原包被浓度与吸光度(A值)正相关；电泳显示适配子得到富集筛选；测序后软件分析表明多条适配子有共有序列,空间结构多样；用ELISA法,结合辣根过氧化物酶(HRP)标记链霉亲和素(SA)与生物素标记的适配子,对适配子与P24的亲和力进行验证,表明筛选到的适配子与P24抗原有特异性的高亲和力结合.结论 建立了一种简便的筛选HIV-1 P24抗原适配子的方法,筛选到特异性的高亲和力P24适配子.