海南蒟cDNA文库的构建及评价

• 作者: 凌鹏 李付鹏 范睿 邬华松 郝朝运 闫林 顾文亮 黄丽芳
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 海南蒟 叶片 cDNA文厍 构建
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 生物技术与组织培养
• 页码范围: 636-640
• 页数: 5页
• 分类号: Q949.732.3
• 字数: 4446字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2013.04.010

摘要

全长cDNA文库构建是改良胡椒性状的分子机理研究基础,有助于重要相关基因的克隆、功能分析、调控及其利用.以性状优良并具代表性的海南蒟(Piper hainanense)为试材,采用优化的In-Fusion SMARTerTM Directional cDNA Library Construction Kit技术,构建叶片材料的全长cDNA文库.结果表明:文库的滴度为2.0×106 cfu/mL,文库容量为1.3×106 cfu.从文库中随机挑取20个克隆进行质粒DNA提取、PCR及酶切鉴定,结果显示:插入片段大小为1.0～2.0 kb,重组率为100％,表明该文库质量较高,可满足后续研究需要.