衰老心肌中Omi/HtrA2表达增加可促进心肌细胞自噬

• 作者: 刘慧荣 刘腾 张苏丽 徐海波 李笑 杜芸辉 王可 白克华 马新亮
• 来源期刊: 中华老年多器官疾病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 衰老 Omi/HtrA2 自噬 心肌细胞
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 53-57
• 页数: 5页
• 分类号: R331.3+6
• 字数: 3694字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1264.2013.00014

摘要

目的 探讨衰老心肌中增加的Omi/HtrA2在心肌细胞自噬中的作用.方法 用D-半乳糖干预胎鼠心肌细胞系H9c2建立衰老细胞模型,β-半乳糖苷酶染色观察细胞的衰老情况,cck8试剂盒检测细胞存活率,并以分析细胞乳酸脱氢酶(Lactic Dehydrogenase,LDH)水平反映其活性；给予Omi/HtrA2特异性抑制剂ucf-101降低Omi/HtrA2活性,构建稳转Omi/HtrA2的H9c2细胞株过表达Omi/HtrA2；采用western blot法测定心肌细胞中Omi/HtrA2、beclinl及LC3-Ⅱ蛋白的表达.结果 (1)与H9c2心肌细胞相比,D-半乳糖诱导的H9c2心肌细胞内β-半乳糖苷酶染色阳性率显著升高[(87.7±3.6％)vs(18.3±2.8％),P＜ 0.01]; cck8结果显示,两组之间无显著性差异(P＞0.05),但D-半乳糖诱导的H9c2心肌细胞中LDH活性明显升高(7.07±0.65 vs 5.93±0.34,P＜ 0.01).(2)与H9c2细胞相比,D-半乳糖诱导的H9c2心肌细胞中Omi/HtrA2蛋白表达升高(P＜0.05),而beclinl表达下降(P＜0.01)；给予ucf-101后,衰老细胞中Omi/HtrA2蛋白表达明显下降(P＜0.05),而beclin1表达则进一步降低(P＜0.01).(3)与H9c2细胞相比,过表达Omi/HtrA2的H9c2心肌细胞Omi/HtrA2蛋白表达增高,LC3-Ⅱ蛋白表达也增高(P＜0.05)；给予过表达Omi/HtrA2的H9c2心肌细胞ucf-101后,LC3-Ⅱ表达下降(P＜0.05).结论 衰老心肌细胞中Omi/HtrA2的表达增加可促进心肌细胞自噬.