Hath1基因真核表达载体的构建及其在SH-SY5Y细胞中的表达

• 作者: 宋丽华 王敏 许小敏 迟玉涛 齐力
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: Hath1基因 gfp基因 真核表达 荧光显微镜
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 759-762,后插4
• 页数: 5页
• 分类号: Q782
• 字数: 2767字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7694/jldxyxb20130424

摘要

目的:构建携带Hath1基因的真核表达载体并转染神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y),观察其在SH-SY5Y细胞中的表达.方法:从人全血中提取DNA,克隆Hath1基因,同时扩增绿色荧光蛋白(GFP) gfp基因；利用引物GFP-R和Hath1-F扩增融合基因gfp-Hath1,克隆至pMD18-T中；经Xho Ⅰ和EcoR Ⅰ限制性内切酶酶切,构建重组表达质粒pCDNA3.1(+)::gfp-Hath1；转染SH-SY5Y细胞.结果:PCR扩增,融合基因gfp-Hath1扩增条带大小为2 023 bp,表明成功扩增gfp-Hath1融合基因.经双酶切鉴定,成功构建真核表达质粒pCDNA3.1(+)::gfp-Hath1.采用间接免疫荧光技术在荧光显微镜下观察到5H-SY5Y细胞中有GFP表达.结论:本研究成功地使Hath1基因在SH-SY5Y细胞中得到表达,为转染耳蜗组织的实验及探索治疗耳聋新方法奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋丽华	内蒙古民族大学附属医院耳鼻喉科	23	60	3.0	7.0
2	王敏	内蒙古民族大学附属医院耳鼻喉科	21	83	5.0	9.0
3	齐力	内蒙古民族大学附属医院耳鼻喉科	9	38	2.0	6.0
4	迟玉涛	内蒙古民族大学附属医院耳鼻喉科	3	1	1.0	1.0
5	许小敏	内蒙古自治区赤峰市医院神经内科	1	0	0.0	0.0