耐有机溶剂脂肪酶基因lipI的克隆及其在毕赤酵母中的高效表达

• 作者: 万一 张志敏 张琨 张继生 王军 王燕 王琰 訾静 高建新
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 耐有机溶剂 脂肪酶基因 毕赤酵母 表达
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 143-148
• 页数: 6页
• 分类号: S816.73
• 字数: 4629字
• 语种: 中文

摘要

为了实现耐有机溶剂脂肪酶基因的真核表达,参照GenBank公布的脂肪酶基因序列设计简并引物,通过PCR扩增出G.geotrichum SXL-107的全长1 692 bp、编码563个氨基酸的脂肪酶基因lipI,基因登录号为JX074060.利用Signal P 3.0软件对lipI基因序列进行分析,将去除自身信号肽的成熟lipI基因克隆到诱导型表达载体pPIC9K上,构建胞外重组表达载体pPIC9K-lipI,转化毕赤酵母KM71,发酵培养72 h,发酵上清液中脂肪酶活力达到70 U/mL,与野生型脂肪酶产生菌Galactomyces geotrichum SXL-107相比,脂肪酶活力提高7倍.获得的重组脂肪酶的最适温度40℃、pH值为6.5,在10％的甲醇溶液中作用48 h后仍然保持60％以上的酶活力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张琨		20	32	3.0	4.0
2	王琰		17	61	4.0	6.0
3	张志敏		20	75	6.0	7.0
4	万一		37	127	7.0	10.0
5	訾静		14	44	4.0	6.0
6	王军		15	29	3.0	4.0
7	王燕		21	44	4.0	6.0
8	张继生		1	1	1.0	1.0
9	高建新		1	1	1.0	1.0