大豆GmTIP1;1基因的克隆与表达分析

• 作者: Ali ZULFIQAR 何晓兰 刘晓庆 张大勇 徐照龙 易金鑫* 胡国民 袁玲玲 许玲 马鸿翔 黄益洪
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: GmTIP1 1 组织表达 诱导表达 酵母表达
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 页码范围: 76-83
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2013.00076

摘要

利用RT-PCR方法从大豆根部组织获得Glyma03g34310.1开放阅读框(ORF)全长,经测序验证、Blast比对与同源性分析发现该序列编码的蛋白质与其他植物的 TIP1;1蛋白具有较高的相似性,故命名为 GmTIP1;1基因(GenBank登录号为AK285481),该基因ORF长753 bp,编码1个包含250个氨基酸的蛋白,在ORF内部第381个核苷酸处含有1个94 bp的内含子,符合↓GT--AG↓的剪接方式;系统进化树分析发现GmTIP1;1聚类到豆科植物分支,其他不同科的植物也有规律地聚到了不同分支,推测该蛋白氨基酸序列可以作为植物分类的依据之一;半定量RT-PCR结果表明该基因在大豆的不同器官、不同器官的不同发育阶段均具较高且同等的表达水平,暗示该基因在植物的整个发育进程中均具重要作用;在盐胁迫的不同时间点其表达量有下降的趋势,但仍然保持较高的表达水平;以pYES2为酵母表达载体,转化酿酒酵母INVSc1菌株,获得重组酵母INVSc1(pYES2-GmTIP1;1),转化菌株在盐胁迫下的存活率明显高于对照INVSc1(pYES2),而在干旱胁迫下则没有显著差异,表明该基因的表达能有效地提高酵母的耐盐性.