两个对虾新型表达载体的构建

• 作者: 兰宗宝 彭金霞 谢达祥 赵永贞 陈晓汉 马春霞 黎铭
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 凡纳滨对虾 表达载体 白斑综合症病毒(WSSV) 启动子 口服疫苗
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·水产·蚕桑
• 页码范围: 2080-2084
• 页数: 5页
• 分类号: S945.46
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2013.12.2080

摘要

[目的]构建一种能在对虾细胞内稳定存在的新型表达载体,为对虾口服疫苗的研制奠定基础.[方法]设计特异性引物,以对虾白斑综合症病毒(WSSV)DNA为模板,PCR扩增早期基因启动子IE1的不同长度片段IE(-94/+52)和IE(-945/+52);利用限制性酶切及连接的方法,以IE(-94/+52)和IE(-945/+52)替换pcDNA3.1-GFP的CMV启动子;然后将构建好的表达载体与阳离子脂质体转染试剂TransLipidTM混合,肌肉注射凡纳滨对虾.[结果]经双酶切鉴定,表达载体pcDNA3.1-IE(-94/+52)-GFP、pcDNA3.1-IE (-945/+52)-GFP分别获得6150和146bp、6150和997 bp的目的条带;注射pcDNA3.1-IE(-94/+52)-GFP、pcDNA3.1-IE(-945/+52)-GFP的对虾部分体细胞在荧光显微镜下可见绿色荧光,且注射pcDNA3.1-IE(-94/+52)-GFP的绿色荧光强度强于注射pcDNA3.1-IE (-945/+52)-GFP.[结论]构建的两个新型表达载体pcDNA3.1-IE(-94/+52)-GFP、pcDNA3.1-IE(-945/+52)-GFP均可用于对虾病毒抗原蛋白基因的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈晓汉		62	510	10.0	20.0
2	谢达祥		17	252	7.0	15.0
3	赵永贞		14	34	4.0	5.0
4	黎铭		11	47	5.0	6.0
5	兰宗宝	广西农业科学院农业科技信息研究所	62	334	10.0	15.0
6	马春霞		8	13	2.0	3.0
7	彭金霞		6	8	2.0	2.0