利用SYBR Green real-time PCR方法监控鸡外周血淋巴细胞中马立克病毒的载量

• 作者: 李玉峰 袁志栋 金元昌 韦平
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 马立克病毒 外周血淋巴细胞 real-time FQ-PCR meq基因
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1170-1173,1178
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

建立基于SYBR Green Ⅰ的real-time FQ-PCR方法检测并定量鸡外周血淋巴细胞(peripheral blood leukocytes,PBLs)中马立克病毒(Marek's disease virus,MDV)的载量(以meq基因为定量标准),并将此技术的敏感性与标准PCR方法进行对比.应用PCR技术从MDV-1攻毒后的霞烟鸡PBLs中扩增MDV meq基因的部分片段,纯化上述基因的DNA扩增产物,然后克隆到pGM-T载体,重组质粒通过PCR和EcoR Ⅰ酶切及测序分析进行确认；将浓度梯度的meq基因的重组标准品质粒DNA进行real-time FQ-PCR,建立其相应的标准曲线.同样以质粒DNA为模板,real-time FQ-PCR方法的最低检出率为10拷贝,而标准PCR的最低检出率则为32拷贝.结果表明,在检测MDV时,real-time FQ-PCR敏感度比标准PCR要高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玉峰	湖南科技大学生命科学学院	28	149	8.0	11.0
2	韦平	广西大学养禽与禽病研究所	310	2120	22.0	32.0
3	金元昌	湖南科技大学生命科学学院	26	110	5.0	9.0
7	袁志栋	湖南科技大学生命科学学院	15	50	4.0	6.0