猪圆环病毒2型SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 岳华 张焕容 程方明
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒2型(PCV-2) 荧光定量PCR PK15细胞 病毒增殖
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 13-17
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

为了研究猪圆环病毒2型(PCV-2)在PK15细胞中的动态增殖,试验根据PCV-2ORF2基因保守区设计特异性引物,经PCR扩增和克隆目的基因制备阳性质粒,建立了基于SYBR Green Ⅰ的PCV-2荧光定量PCR方法,并利用该方法检测PCV-2在PK15细胞上的动态增殖情况.结果表明:建立的荧光定量PCR方法在2.0×102 ～2.0×109拷贝/μL内有良好的线性关系,其相关系数为0.998 9,扩增效率为99.50％;该方法的最低检测限为20拷贝/μL,检测不出猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪细小病毒等;PCV-2感染PK15细胞后84小时病毒量达最高,为1.2×107拷贝/μL,该时间点为收获病毒的最佳时间.说明所建立的荧光定量PCR方法特异性好,灵敏度高,稳定可靠.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	岳华		187	1071	15.0	23.0
2	张焕容		91	312	9.0	13.0
3	程方明		4	16	3.0	4.0