异子蓬异型种子萌发基因差显的cDNA-AFLP技术体系优化

• 作者: 兰海燕 吕秀云 邢佳佳 陈莎莎
• 来源期刊: 西北农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 异子蓬 异型种子 萌发 cDNA-AFLP技术
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 页码范围: 65-71
• 页数: 7页
• 分类号: Q781
• 字数: 5909字
• 语种: 中文

摘要

以异子蓬种子为材料,建立并优化其萌发过程中基因表达差显的cDNA-AFLP技术体系.分别以总RNA和mRNA反转录的双链cDNA为模板,对25 μL PCR扩增体系中的退火温度、引物量、DNA聚合酶种类及电泳条件进行优化.结果显示,以分离的mRNA为模板可以反转录得到品质较好的双链cDNA; PCR扩增选择较高退火温度(第1轮为56℃,第2轮为65～56℃)、引物量为1μL(10 μmol/L)、使用高效Premix LA Taq Hot Start DNA聚合酶、在约800 V电压下进行60 g/L变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,可得到条带清晰、多态性好的cDNA-AFLP结果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	兰海燕	新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源与基因工程重点实验室	43	237	10.0	14.0
2	吕秀云	新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源与基因工程重点实验室	4	16	2.0	4.0
3	陈莎莎	清华大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0