二斑叶螨内参基因的筛选及解毒酶基因的表达水平

• 作者: 吕娟娟 岳秀利 沈慧敏 王进军 高新菊
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 内参基因 RT-qPCR CCEs GSTs P450s 二斑叶螨
• 年，卷（期）: 2013,（21）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 4542-4549
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.21.017

摘要

[目的]筛选二斑叶螨（Tetranychus urticae）敏感（SS）和抗甲氰菊酯品系（Fe-R）中合适的内参基因，并通过基因相对表达定量PCR研究二斑叶螨抗性品系解毒酶基因表达水平的变化。[方法]采用实时荧光定量PCR（quantitative real time PCR，RT-qPCR）技术，分析二斑叶螨5.8S rRNA、α-tubulin、β-actin、ELF、GAPDH、RPL13a、SDHA 和 TBP 共8个候选内参基因 mRNA 表达水平的稳定性，并分析二斑叶螨酯酶（Carboxyl/cholinesterases，CCEs）、谷胱甘肽转移酶（Glutathione s-transferase，GSTs）及细胞色素P450单加氧酶（Cytocheome P450 monooxygenases，P450s）等主要解毒酶基因相对表达量。用GeNorm和NormFinder软件进行内参基因稳定性评估，通过比较 Ct 值的方法进行基因相对表达量计算。[结果]8个内参基因中稳定性最高的为α-tubulin；以α-tubulin为内参基因，二斑叶螨Fe-R品系GSTs基因TuGSTo1、TuGSTd1及P450s基因CYP3D2相对表达量均显著高于SS品系，而CCEs基因TuCCE1的表达量有所降低。[结论]在二斑叶螨SS和Fe-R品系中α-tubulin为理想的内参基因，RT-qPCR研究表明TuGSTo1、TuGSTd1和CYP3D2相对表达量的升高可能是二斑叶螨对甲氰菊酯产生高抗性的分子机理。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王进军	西南大学植物保护学院	131	1530	22.0	30.0
2	沈慧敏	甘肃农业大学草业学院	73	1080	18.0	30.0
3	高新菊	甘肃农业大学草业学院	4	75	3.0	4.0
4	岳秀利	甘肃农业大学草业学院	2	21	2.0	2.0
5	吕娟娟	甘肃农业大学草业学院	1	15	1.0	1.0