球孢白僵菌HsbA蛋白的原核表达及免疫定位

• 作者: 吉青战 张烨 王海鸿 雷仲仁
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 球孢白僵菌 HsbA蛋白 原核表达 多克隆抗体 免疫电镜
• 年，卷（期）: 2013,（21）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 4534-4541
• 页数: 8页
• 字数: 5443字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.21.016

摘要

[目的]明确虫生真菌球孢白僵菌（Beauveriabassiana）疏水表面结合蛋白HsbA（hydrophobic surface binding protein A）的致病过程。[方法]对HsbA进行克隆、亚克隆和原核表达，根据纯化后的蛋白制备多克隆抗体并进行抗原性分析，利用免疫电镜对HsbA蛋白进行定位观察。[结果]原核表达系统成功诱导了白僵菌的HsbA融合蛋白，制备多克隆抗体经Western杂交分析表明，该多抗能特异性识别目的蛋白。免疫电镜结果显示，HsbA蛋白在孢子和菌丝中呈随机分布。正常生长状态下，菌丝中的HsbA蛋白数量要明显多于孢子中被标记的数目，此外，孢子在侵染状态和正常生长状态下的HsbA蛋白数量也有显著差异，侵染状态下孢子的HsbA蛋白表达量更高，但菌丝在这2种状态下均呈现高表达。感染虫体中HsbA蛋白被标记的部位集中在体壁。[结论]原核表达实现了HsbA 蛋白的高效表达，且制备的多克隆抗体具有较好的免疫原性。此外，免疫定位表明 HsbA 蛋白与菌丝的生长有关，并在白僵菌致病过程中参与了吸附作用，其作用部位位于昆虫体壁。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	雷仲仁	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	70	979	18.0	27.0
2	王海鸿	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	24	226	8.0	14.0
3	张烨	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	6	40	3.0	6.0
4	吉青战	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	4	21	3.0	4.0