紫薇SSR-PCR反应体系优化和引物筛选

• 作者: 张振宇 李亚 杨如同 王鹏 马玲玲 马育珠
• 来源期刊: 黑龙江农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 紫薇 SSR-PCR 体系优化 引物筛选
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 17-21,27
• 页数: 6页
• 分类号: S685.99
• 字数: 3089字
• 语种: 中文

摘要

为加强紫薇分子遗传学研究，以紫薇叶片DNA为模板，采用4因素（模板浓度、dNTP、引物浓度、酶浓度）3水平的L9（34）正交设计，优化紫薇的SSR-PCR反应体系，并对24对紫薇SSR引物进行了筛选。结果表明：紫薇10μLSSR-PCR的最优反应体系为：Taq酶0．2 U、Mg2＋2．5 mmol·L-1、dNTP 0．15 mmol·L-1、F-primer 0．25 mmol·L-1、R-primer 0．25 mmol·L-1、DNA 60 ng ，ddH2 O补至10μL ；24对EST-SSR引物筛选出可扩增出条带的引物23对，其中16对具有多态性，共扩增出清晰条带68条，差异条带39条。