烟酰胺削弱罗格列酮诱导猪前体脂肪细胞凋亡的作用与分子机制

• 作者: 孙世铎 庞卫军 杨公社 熊燕 许儒祥
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 猪 烟酰胺 罗格列酮 前体脂肪细胞 凋亡
• 年，卷（期）: 2013,（18）
• 所属期刊栏目: 畜牧?兽医?资源昆虫
• 页码范围: 3878-3886
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.18.018

摘要

[目的]探讨烟酰胺（nicotinamide, NIC）和罗格列酮（rosiglitazone, RSG）对猪前体脂肪细胞凋亡的作用及分子机制，寻找通过凋亡方式调控脂肪细胞数目进而控制生脂的新途径。[方法]分别用含有0、0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 mmol·L-1 RSG 的培养基处理猪前体脂肪细胞，在处理后的48 h，对不同处理组细胞进行Hoechst33258和Annexin-V-FITC/PI染色以观察细胞形态，流式细胞仪分析细胞凋亡情况；并收集细胞总蛋白，用 Western blotting 方法检测细胞凋亡关键基因的蛋白表达水平；基于 RSG 促凋亡的浓度梯度结果，选用1.0 mmol·L-1 RSG分别与含0、0.1、0.2和0.3 mmol·L-1 NIC的培养基共处理细胞，在处理后的48 h，染色并观察细胞形态，流式细胞仪分析细胞凋亡情况；并收集细胞总蛋白、细胞质蛋白和细胞核蛋白，检测细胞凋亡关键基因的蛋白水平。[结果]RSG以浓度依赖方式诱导猪前体脂肪细胞凋亡，减少了细胞数目；Bcl-2和cleaved Caspase-3凋亡关键蛋白水平随RSG浓度增加而上升，Bax则下降；0.1（P＜0.05）、0.2（P＜0.01）和0.3 mmol·L-1（P＜0.01）NIC显著削弱1 mmol·L-1 RSG诱导猪前体脂肪细胞凋亡，Bcl-2和cleaved Caspase-3水平显著被下调（P＜0.05），Bax则被上调（P＜0.05）；0.3 mmol·L-1 NIC明显有助于1 mmol·L-1 RSG处理的猪前体脂肪细胞中的Sirt1由细胞质向核转移，且抑制核中cleaved Caspase-3水平。[结论]NIC通过促进Sirt1由细胞质到核的转位以及下调核中cleaved Caspase-3水平削弱RSG诱导的猪前体脂肪细胞凋亡。