家蚕丝腺生物反应器表达狂犬病病毒核蛋白

• 作者: 危浩 叶露鹏 周继勇 尤征英 王少华 钟伯雄 阮系真
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 狂犬病 丝腺生物反应器 piggyBac 家蚕
• 年，卷（期）: 2013,（18）
• 所属期刊栏目: 畜牧?兽医?资源昆虫
• 页码范围: 3922-3929
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.18.023

摘要

[目的]采用家蚕丝腺生物反应器这一蛋白高效表达系统，尝试建立一种高效、低廉、稳定生产狂犬病病毒核蛋白（RVNP）的技术体系，为生产基因工程疫苗奠定基础。[方法]通过RT-PCR方法克隆获得RVNP序列，采用家蚕丝胶蛋白基因（Ser1）启动子为特异性启动子，将RVNP构建到含有增强型绿色荧光蛋白（EGFP）筛选标记基因的piggyBac转座子表达载体（pBA3EGFP）中，并采用显微注射转基因家蚕技术构建家蚕丝腺生物反应器。[结果]G1代通过EGFP标记的筛选获得转基因家蚕阳性蛾区26个，蛾圈阳性率为59.09%。PCR实验证实RVNP已经整合到家蚕基因组中，Western blot 分析表明 RVNP 蛋白可能附着于丝胶蛋白并随家蚕吐丝行为分泌到蚕茧中。[结论]获得了能够表达外源的RVNP蛋白的转基因家蚕品系，该系统有望成为高效、低廉、稳定地生产狂犬病基因工程疫苗的技术体系之一。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周继勇	浙江大学农业部动物病毒学重点实验室	86	753	16.0	23.0
2	尤征英	浙江大学动物科学学院特种经济动物科学系	1	4	1.0	1.0
3	危浩	浙江大学动物科学学院特种经济动物科学系	3	15	3.0	3.0
7	阮系真	浙江大学农业部动物病毒学重点实验室	5	8	2.0	2.0
8	叶露鹏	浙江大学动物科学学院特种经济动物科学系	2	9	2.0	2.0
9	王少华	浙江大学动物科学学院特种经济动物科学系	3	11	2.0	3.0