持续高表达CXC趋化因子受体-4重组慢病毒颗粒的包装鉴定及细胞迁移

• 作者: 冯世庆 刘畅 孔晓红 张亮 张彬 张衍军 王奇
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: CXC趋化因子受体-4 基质细胞衍生因子-1α 慢病毒 细胞迁移
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 605-608
• 页数: 4页
• 字数: 3304字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2013.03.063

摘要

目的 观察持续高表达CXC趋化因子受体-4(CXCR4)慢病毒颗粒在细胞迁移的作用.方法 从大鼠大脑组织提取总RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)得到大鼠cDNA文库,以cDNA为模板,经过PCR获得CXCR4基因,测序正确后连接到pCDH1-MCS-EF1-copGFP(慢病毒载体质粒),与第3代慢病毒其余辅助质粒pMDLG/pRRE、pRsv-Rev及pVSV-G按照1∶4∶ 1∶1共转染293T细胞包装慢病毒,超离慢病毒,测定病毒滴度,感染Hela细胞72h与14 d后,分别观察Hela细胞荧光,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)测定Hela细胞表达大鼠CXCR4 mRNA含量,Transwell小室观察细胞迁移.结果 测序CXCR4基因序列正确,并成功连接到pCDH1-MCS-EF1-copGFP,利用第3代慢病毒包装系统成功包装慢病毒,经超离慢病毒颗粒,流式细胞仪测定慢病毒滴度为7.89×105,持续观察Hela细胞荧光强度,Real-time PCR检测结果示Hela细胞表达大鼠CXCR4 mRNA水平显著升高(72 h为78.29倍,至14 d为58.93倍),Transwell小室观察到高表达CXCR4的慢病毒颗粒感染组细胞迁移多(P＜0.05).结论 高效感染力并持续高表达CXCR4的慢病毒颗粒可持续促进细胞迁移,并有基质细胞衍生因子-1 α(SDF-1o)浓度依赖性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯世庆	天津医科大学总医院骨科	221	1968	24.0	33.0
2	张彬	天津医科大学总医院骨科	6	24	3.0	4.0
3	张亮	天津医科大学总医院骨科	46	159	7.0	10.0
4	刘畅	天津医科大学总医院骨科	20	76	6.0	7.0
5	张衍军	天津医科大学总医院骨科	8	44	4.0	6.0
6	王奇	天津医科大学总医院骨科	4	16	3.0	4.0
7	孔晓红	天津医科大学总医院骨科	8	66	4.0	8.0