基于Ag85B mRNA的荧光定量逆转录PCR快速检测活结核分枝杆菌方法的建立和评价

• 作者: 刘衡川 徐园红 罗影殊 钟晶 高文凤 黄偌颖
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 活菌检测 荧光定量逆转录PCR Ag85B mRNA
• 年，卷（期）: 2013,（18）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3477-3480,3491
• 页数: 5页
• 分类号: R378.91+1
• 语种: 中文

摘要

目的 建立评价荧光定量逆转录PCR快速检测活结核分枝杆菌的方法.方法 建立检测Ag85B mRNA的荧光定量逆转录PCR方法,评价其特异性、灵敏度、重复性、区分细菌存活状态及检测临床样本的能力.结果 该方法特异性强,仅扩增结核分枝杆菌.最低检出限是50 Copies/反应,菌落灵敏度为1.3×103cfu/ml,重复性好,可有效区分死菌和活菌.以培养法为“金标准”,PCR法的灵敏度为100.00％,特异度为84.38％,符合率为93.15％,Kappa值为0.86.结论 荧光定量逆转录PCR检测方法简便、快速、可靠,能有效区分结核分枝杆菌的存活状态,具有较高灵敏度和特异性,适用于临床样本的检测,为结核病的早期诊断、疗效评价及药敏情况分析提供了技术支持,有利于结核病的防控.