miR-148a／b真核表达质粒的构建及其在胰腺癌细胞系中的表达

• 作者: 刘智文 廖国良 文武 李勇 王福飞 肖卫东
• 来源期刊: 南昌大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: miR-148a/b 真核表达质粒 胰腺癌
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 【基础医学】
• 页码范围: 7-9
• 页数: 3页
• 分类号: R735.9
• 字数: 2267字
• 语种: 中文

摘要

目的：构建miR-148a/b真核表达质粒，转染胰腺癌AsPC-1细胞，并观察其miR-148a/b的表达水平。方法根据miRBase提供的序列合成miR-148a/b前体，PCR扩增后形成双链，插入线性化真核表达质粒pcDNA3．1，构建pcDNA3．1/miR-148a/b，进行酶切和测序鉴定。将胰腺癌 AsPC-1细胞分4组进行质粒转染：转染 pcDNA3．1/miR-148a（miR-148a组）、转染 pcDNA3．1/miR-148b（miR-148b组）、转染 pcDNA3．1（空质粒对照组）和仅加脂质体（空白对照组）。转染48 h后，采用定量 PCR法检测各组细胞中 miR-148a/b 的表达量。结果 pcDNA3．1/miR-148a/b的酶切和测序与miRBase提供的序列完全一致。转染48 h后，miR-148a组 AsPC-1细胞中的 miR-148a表达量明显高于空质粒对照组和空白对照组（6．76±0．35比1．00±0．54、1．02±0．40，均P＜0．05），miR-148b 组AsPC-1细胞中的miR-148b表达量明显高于空质粒对照组和空白对照组（3．28±0．08比1．02±0．35、1．01±0．28，均P＜0．05）。结论成功构建了 miR-148a/b真核表达质粒 pcDNA3．1/miR-148a/b，该质粒能显著上调胰腺癌 AsPC-1细胞的miR-148a/b表达水平。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李勇	南昌大学第一附属医院普通外科	148	503	10.0	14.0
2	肖卫东	南昌大学第一附属医院普通外科	65	250	9.0	12.0
3	王福飞	南昌大学第一附属医院普通外科	3	7	2.0	2.0
4	刘智文	江西省儿童医院新生儿外科	22	103	6.0	9.0
5	文武	南昌大学第一附属医院普通外科	9	12	2.0	3.0
6	廖国良	南昌大学第一附属医院普通外科	4	12	2.0	3.0